丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达

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目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白.方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV.重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞.Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况.结果Westernblotting结果表明,在细胞中检测到相对分子质量为70000(NS3)和58 000(Ns5a)的两条带;免疫荧光试验结果表明,无论采用抗NS3单抗还是抗NS
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