【摘 要】
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充足的低温累积和外源赤霉素(GA)处理是反季节催花的常用技术手段,探究内休眠解除的机理是解决催花不良的前提.前期研究表明,GA途径的激活是牡丹(Paeonia suffruticosa)花芽
【机 构】
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青岛农业大学生命科学学院,山东省高校植物生物技术重点实验室,山东青岛266109
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充足的低温累积和外源赤霉素(GA)处理是反季节催花的常用技术手段,探究内休眠解除的机理是解决催花不良的前提.前期研究表明,GA途径的激活是牡丹(Paeonia suffruticosa)花芽内休眠解除的关键环节,而DELLA蛋白是GA信号转导中的负调控因子.本研究从牡丹花芽转录组中筛选出DELLA家族成员中类G4I的EST序列,进行了生物信息学、表达模式和原核表达分析.同源性比对结果表明牡丹类GAI与拟南芥AtGAI序列同源性最高,全长cDNA为2 445 bp,编码区1 848 bp,共编码616个氨基酸,蛋白分子质量为67.26 kDa.实时定量PCR分析表明其在低温诱导的牡丹花芽休眠解除中呈极显著下调.为分析其在蛋白水平上的变化趋势,将PsGA1构建到含MBP的pMAL-c5X原核表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.在18℃、IPTG浓度为1 mmol·L-1的条件下诱导12 h,SDS-PAGE电泳检测MBP-PsGAI融合蛋白分子质量为112 kDa左右.实验结果为进一步纯化PsGAI蛋白及研究其在牡丹休眠解除中的作用提供理论依据.
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