B36-12 重组人可溶性Fas配基在大肠杆菌中的表达、纯化、重折叠和表征Sun KH等

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Fas配基(FasL)是一种Ⅱ型膜蛋白,通过基质金属蛋白酶切割可获得具生物学活性的可溶性形式(sFasL)。sFasL会诱导耐Fas细胞的凋亡,而这一特殊的生物学活性也许可用于癌症治疗。然而,蛋白的三聚体形式使重组sFasL很难获得。本研究将sFasL DNA融合在硫氧还蛋白基因的氨基端,在羧基端加上His标签,在大肠杆菌中过表达。为了限制后继重折叠过程的自由度,将重组sFasL溶于6mol/L尿素,在变性条件下固定于镍树脂。通过逐步稀释法将固定的重组sFasL与过量的变性sFasL共同温育进行重折叠。
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