【摘 要】
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目的：构建GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1（G3BP1）的真核表达载体pEGFP-C3-G3BP1，并观察其在人食管癌EC109细胞中的表达及定位。方法：采用RT-PCR法从EC109细胞中扩增G3BP1cDNA全
【机 构】
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北京工业大学生命科学与生物工程学院
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目的：构建GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1（G3BP1）的真核表达载体pEGFP-C3-G3BP1，并观察其在人食管癌EC109细胞中的表达及定位。方法：采用RT-PCR法从EC109细胞中扩增G3BP1cDNA全长序列，用限制性内切酶HindⅢ和BamHⅠ双酶切PCR产物后克隆至pEGFP-C3载体，转化大肠杆菌DH5α后，挑取阳性克隆提取质粒，经双酶切及测序鉴定；将重组质粒用脂质体法转染EC109细胞，荧光定量RT-PCR和Western印迹检测G3BP1的表达，荧光显微镜观察G3BP1的定位。
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