【摘 要】
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目的研究抗氧化基因——大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的功能区及其调控表达。方法克隆1.76kb大鼠γ-GCS基因的重链亚单位——GCLC基因的上游调控序列,并构建含荧光素
【机 构】
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广州医学院广州呼吸疾病研究所,广州医学院实验医学研究中心
【基金项目】
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广东省自然科学基金(06301136)
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目的研究抗氧化基因——大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的功能区及其调控表达。方法克隆1.76kb大鼠γ-GCS基因的重链亚单位——GCLC基因的上游调控序列,并构建含荧光素酶基因的报道载体GCLC—Luc(GCLC/pGL-3)。利用嵌顿缺失方法构建GCLC基因的缺失体,并将其表达载体转染大鼠肺泡上皮细胞,在细胞中分析该基因的调控区域。通过该方法初步发现GCLC基因的上游调控序列的-745~-705bp属负性调控区域。利用EMSA和supershift证实大鼠肺泡上皮细胞GCLC基因负调控区
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