【摘 要】
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目的 观察六味地黄丸含药血清对氧化应激状态下MC3T3-E1细胞增殖、活性氧及自噬水平的影响。方法 用过氧化氢(H2O2)模拟氧化应激状态后采用不同浓度的六味地黄丸含药血清干预MC3T3-E1细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;通过细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测细胞ROS水平;qRT-PCR检测自噬相关基因Beclin 1、LC3B mRNA表达情况;蛋
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81873323); 福建省自然科学基金(2020J01725); 福建省卫生健康青年科研课题(2019-1-76);
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目的 观察六味地黄丸含药血清对氧化应激状态下MC3T3-E1细胞增殖、活性氧及自噬水平的影响。方法 用过氧化氢(H2O2)模拟氧化应激状态后采用不同浓度的六味地黄丸含药血清干预MC3T3-E1细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;通过细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测细胞ROS水平;qRT-PCR检测自噬相关基因Beclin 1、LC3B mRNA表达情况;蛋白印迹法检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3B表达情况。结果 (1)CCK-8结果显示,H2O2会抑制成骨细胞的增殖,当其浓度为0.10 mmol/L时具有相对较小程度的抑制增殖效果;六味地黄丸含药血清可以促进氧化应激状态下成骨细胞的增殖,且当体积浓度为20%时促进增殖的效果最好。(2)细胞活性氧检测结果显示,六味地黄丸含药血清组ROS水平降低(P<0.05)。(3)qRT-PCR结果显示,六味地黄丸组Beclin 1、LC3B mRNA表达上调(P<0.05),且该作用会被自噬抑制剂所抑制。(4)蛋白印迹法结果显示,六味地黄丸组Beclin 1蛋白表达上调(P<0.05),蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ比值增高(P<0.05)。结论 六味地黄丸含药血清可以促进氧化应激状态下成骨细胞增殖、降低细胞ROS水平,其机制可能与诱导细胞自噬相关。
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