【摘 要】
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目的:探讨RNA干扰酪蛋白激酶2(CK2α)基因表达后对HCT116细胞生长的抑制作用并阐明其作用机制。方法:针对CK2α的mRNA序列设计CK2α-siRNA序列,将体外培养的HCT116细胞分为正
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目的:探讨RNA干扰酪蛋白激酶2(CK2α)基因表达后对HCT116细胞生长的抑制作用并阐明其作用机制。方法:针对CK2α的mRNA序列设计CK2α-siRNA序列,将体外培养的HCT116细胞分为正常对照组(未转染)、阴性对照组(转染siRNA)和CK2α-siRNA组(转染CK2α-siRNA),应用Lipofectamine 2000进行转染,利用Western blotting法检测CK2α、cyclin H、P53和P21蛋白表达水平;应用MTT法检测各组HCT116细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞周期时相的分布。结果:与阴性对照组比较,CK2α-siRNA组CK2α和细胞周期蛋白cyclin H的表达水平明显降低(P<0.01),P53蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),P21蛋白表达水平则明显升高(P<0.01);MTT检测,与阴性对照组比较,转染48和72h,CK2α-siRNA组细胞存活率明显降低(P<0.01);流式细胞术分析,与阴性对照组比较,CK2α-siRNA组S期细胞所占比例逐渐减少(P<0.01),G1期细胞则明显增加(P<0.01),细胞滞留在G1期。结论:RNA干扰CK2α表达能够抑制HCT116细胞增殖,发生G1期阻滞;其机制可能与RNA干扰CK2α表达后cyclin H表达下调及P53活性恢复有关。
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