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大肠杆菌LTb蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

来源 :浙江农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lidongying

【摘 要】

：

将大肠杆菌不耐热肠毒素LTb基因去除信号肽后与载体pPIC9K连接，电转化入酵母菌SMD1168中进行诱导表达。用纯化的LTb表达蛋白免疫8周龄BALB／c鼠3次后，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进

【作 者】

：

刘焕 王一成 袁秀芳 徐丽华 

【机 构】

：

浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,新疆农业大学动物医学学院

【出 处】

：

浙江农业科学

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

大肠杆菌LTb 单克隆抗体 

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将大肠杆菌不耐热肠毒素LTb基因去除信号肽后与载体pPIC9K连接，电转化入酵母菌SMD1168中进行诱导表达。用纯化的LTb表达蛋白免疫8周龄BALB／c鼠3次后，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合后，以间接ELISA和有限稀释法进行筛选，获得4株能稳定分泌抗大肠杆菌LTb单克隆抗体的杂交瘤细胞株，该株单克隆抗体命名为1F2，2C2，3D6，4H6株。经Westernblotting分析，这4株均能与大肠杆菌LTb表达蛋白产生特异性反应。抗体亚型鉴定表明，1F2，2C2，3D6，4H6株均为IgG2

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