论文部分内容阅读
目的 探讨右美托咪定(DEX)对高糖诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响及作用机制.方法 体外培养心肌细胞H9C2,分别用葡萄糖浓度为5.5、35 mmol/L的DMEM培养基培养,分别作为对照组和高糖损伤模型组.分别使用不同浓度(5、10、20 μg/L) DEX处理心肌细胞记为实验1组、实验2组、实验3组.检测各组乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测微小RNA-126(miR-126)的表达量.分别将miR-NC、miR-126 mimicis转染至心肌细胞,使用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L的DMEM培养基培养24 h,分别记为miR-NC组、miR-126组.分别将miR-NC、miR-126 mimcis、anti-miR-NC、anti-miR-126转染至心肌细胞,采用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L与DEX浓度为20 μg/L的DMEM培养基培养,分别记为实验3+ miR-NC组、实验3+miR-126组、实验3+anti-miR-NC组、实验3+anti-miR-126组.流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3的前体蛋白(pro-caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cl-caspase-3)水平.结果 与对照组比较,高糖损伤模型组LDH、MDA含量显著升高(P＜0.05),SOD含量显著降低(P＜0.05),miR-126的表达水平显著降低(P＜0.05),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),cl-caspase-3蛋白水平显著升高(P＜0.05),pro-caspase-3蛋白水平显著降低(P＜0.05).与高糖损伤模型组比较,实验1组、实验2组、实验3组LDH、MDA含量显著降低(P＜0.05),SOD含量显著升高(P＜0.05),miR-126的表达水平升高(P＜0.05),细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),cl-caspase-3蛋白水平显著降低(P＜0.05),pro-caspase-3蛋白水平显著升高(P＜0.05),实验1组、实验2组、实验3组间各指标比较差异有统计学意义(P＜0.05).与miR-NC组比较,miR-126组LDH、MDA含量显著降低(P＜0.05),SOD含量显著升高(P＜0.05),细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),cl-caspase-3蛋白水平显著降低(P＜0.05),pro-caspase-3蛋白水平显著升高(P＜0.05).miR-126过表达能增强DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡,抑制miR-126表达能逆减弱DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡.结论 DEX可通过上调miR-126的表达从而抑制高糖诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡.