【摘 要】
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本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗
【机 构】
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华南农业大学,广东大华农动物保健品股份有限公司,华农温氏畜牧股份有限公司
【基金项目】
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广东大华农动物保健品股份有限公司科研基金(033A201005-2)
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本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10μg/mL,37℃包被2h;封闭液选择含20g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30min;底物显色时间为15min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。
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