【摘 要】
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目的确定HIV-1包膜(envelope,env)单基因扩增(single genome amplification,SGA)的最优反应体系,获得env单基因扩增产物。方法采用SGA及Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,并对Nest-
【机 构】
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哈尔滨医科大学微生物学教研室,哈尔滨市食品药品检验检测中心
【基金项目】
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艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2008ZX10001-012),黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12511184),黑龙江省卫生厅科研课题(2011-205)
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目的确定HIV-1包膜(envelope,env)单基因扩增(single genome amplification,SGA)的最优反应体系,获得env单基因扩增产物。方法采用SGA及Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,并对Nest-PCR反应体系中各成分量进行优化;在此基础上,适当稀释HIV-1感染者cDNA模板进行Nest-PCR,以获得PCR扩增产物阳性率不超过30%的模板稀释度。结果 SGA Nest-PCR扩增HIV-1 env全长基因,引物浓度为0.3μmol/L,dNTP浓度为0
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