【摘 要】
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目的建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法。方法将SS2四川人源分离株ZYH24EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF—GST)采用亲和层析法纯化、经凝
【机 构】
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聊城职业技术学院,南京军区军事医学研究所
【基金项目】
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国家“十五”科技攻关(2003BA712A03-05);国家自然科学基金(30600533);江苏省自然基金(BK2008066、BK2006014)
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目的建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法。方法将SS2四川人源分离株ZYH24EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF—GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的蛋白。以纯化的EF免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗EF单克隆抗体(McAbs)进行特异性分析,并建立猪链球菌EF检测方法。结果得到rEF—GST和EF相对分子量分别为62000和35000;建立了4株稳定分泌抗EF McAbs的杂交瘤细胞系2G
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