时实荧光定性PCR实验室内质控方法的建立及探讨

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目的 探索时实荧光定性PCR实验血液病毒核酸筛查室内质控方法.方法 使用一系列稀释的已知浓度的标准品与常规标本同时进行测定,根据系列浓度标准品的CT值与起始模板(RNA或cDNA)的线性比例关系,绘制标准曲线.待测标本的浓度则可根据其测定的CT值,从校正曲线或回归方程计算得到原始模板的数量.结果 室内质控品浓度与CT值在0.05水平呈高度负相关,HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA与CT值的相关系数为(r=-0.873,-0.966,-0.797).利用回归方程或标准曲线,可得到原始模板的数量.原始CT值以及通过回归方程计算浓度值进行正态性检验,服从正态分布.结论 时实荧光定性PCR实验中,利用回归方程或标准曲线法计算原始模板的浓度,通过浓度值建立Levey-Jennings质控图,可用于日常监控核酸提取扩增检测的有效性.
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