【摘 要】
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目的 利用Cre/loxp基因敲除技术制备全身microRNA-21(miR-21)基因敲除小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究宿主miR-21在血吸虫感染后发挥的调控作用提供研究平台.方
【机 构】
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徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏徐州,221004;第二军医大学热带传染病学教研室,上海,200433
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目的 利用Cre/loxp基因敲除技术制备全身microRNA-21(miR-21)基因敲除小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究宿主miR-21在血吸虫感染后发挥的调控作用提供研究平台.方法 将引进的miR-21 flox/flox小鼠和全身表达Cre重组酶的小鼠分别进行繁殖和鉴定,两种小鼠进行杂交,对其子代小鼠(F1)的基因型进行鉴定;将基因型为miR-21flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21flox/flox小鼠进行杂交,对其子代小鼠(F2)的基因型进行鉴定.结果 共繁殖亲代miR-21flox/flox小鼠20只,经鉴定均为miR-21 flox纯合子小鼠,繁殖表达Cre重组酶的亲代小鼠17只.亲代小鼠杂交并繁殖,得到基因型为miR-21flox/-Cre的F1小鼠10只.将miR-21flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21flox/flox小鼠杂交并繁殖,得基因型为miR-21 flox/-Cre或miR-21flox/-Cre的F2小鼠,miR-21flox/flox Cre小鼠即为本实验所需要构建的全身miR-21基因敲除小鼠.这种基因敲除小鼠与正常小鼠身长、体重无明显差异.结论 本研究利用Cre/loxp技术成功繁育出全身miR-21基因敲除小鼠.
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