【摘 要】
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目的 评价国产阳离子交换介质Nanogel 50SP在诺如病毒样颗粒(Norovirus virus-like particles,NV-VLPs)纯化中的适用性.方法 观察并比较两种介质Nanogel 50SP和Poros 50HS在显微镜下的形态.比较Nanogel 50SP层析柱和Poros 50HS层析柱对NV-VLPs粗纯液的上样载量及两种层析柱纯化NV-VLPs粗纯液的工艺,比较Nano-gel 50SP层析柱纯化NV-VLPs粗纯液工艺的稳定性.结果 Nanogel 50SP介质形态大小较P
【机 构】
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兰州生物制品研究所有限责任公司中试研究室 甘肃省疫苗工程技术研究中心,甘肃 兰州730046
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目的 评价国产阳离子交换介质Nanogel 50SP在诺如病毒样颗粒(Norovirus virus-like particles,NV-VLPs)纯化中的适用性.方法 观察并比较两种介质Nanogel 50SP和Poros 50HS在显微镜下的形态.比较Nanogel 50SP层析柱和Poros 50HS层析柱对NV-VLPs粗纯液的上样载量及两种层析柱纯化NV-VLPs粗纯液的工艺,比较Nano-gel 50SP层析柱纯化NV-VLPs粗纯液工艺的稳定性.结果 Nanogel 50SP介质形态大小较Poros 50HS更为均一.上样35个柱体积(column volume,CV)之前,Nanogel 50SP层析柱流穿液中目的蛋白纯度低于Poros 50HS层析柱,而在上样35 CV之后,Nanogel 50SP层析柱上的流穿液中目的蛋白纯度高于Poros 50HS层析柱.纯化同一批NV-VLPs粗纯液时,Nanogel 50SP层析柱收获目的蛋白的回收率稍高于Poros 50HS层析柱.3组重复纯化工艺所得目的蛋白纯度均为100％,粒径分布均符合要求,目的蛋白回收率分别为46.00％、41.98％及44.21％.结论 国产阳离子交换介质Nanogel 50SP适用于NV-VLPs的小试规模纯化,且纯化工艺有较好的稳定性.
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