【摘 要】
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【目的】旨在构建UGT72B14G2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础.【方法】利用RTGPCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14G2基因,在大肠杆菌中表达后,经Ni
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【目的】旨在构建UGT72B14G2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础.【方法】利用RTGPCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14G2基因,在大肠杆菌中表达后,经Ni2+亲和柱纯化、PDG10柱脱盐处理,利用SDSGPAGE检测目标蛋白.【结果】测序结果表明UGT72B14G2基因长度为1422bp,预测其编码473个氨基酸,蛋白质相对分子量(Mr)为51??49k Da,等电点(pI)为6??30;SDSGPAGE检测结果表明当初始菌液OD600约0??6时,诱导4h后目标蛋白即可大量表达,纯化、脱盐和浓缩处理后可获得较高纯度的重组蛋白.【结论】UGT72B14G2属于UDPG葡萄糖基转移酶家族的一员,能够在大肠杆菌中表达.
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