赭纤虫RNA聚合酶Ⅱ锌指基因片段的表达、纯化及多克隆抗体的制备

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以一种进化较为原始的单细胞真核生物日本赭纤虫(Blepharisma japonicum)大核基因组DNA为模板,PCR扩增得到了RNA聚合酶锌指基因片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p1-ZFbl,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDSPAGE和Western blot分析证明目的蛋白得到了可溶性融合表达.用纯化的蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.Western印迹和ELISA鉴定结果表明抗体特异性较高,效价高达1:15000.
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