【摘 要】
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目前，市场上转基因产品越来越丰富，人们在甄选的同时对其安全性的争论也变得尤为激烈，因此，急需一种集简单、快速和便捷的检测方法对转基因产物进行鉴别。重组酶聚合酶恒温扩增技术（recombinase polymerase amplification， RPA）是核酸检测技术发展的新方向，它可以在恒定温度下进行扩增反应，实现在体外扩增目的核酸片段。该技术反应迅速，特异性强且灵敏度较高，满足市场的需求。因
【机 构】
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吉林农业科技学院生物与制药工程学院
【基金项目】
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吉林省科技厅重点研发项目（20200403053SF）； 国家级大学生科技创新项目（202011439020）共同资助；
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目前，市场上转基因产品越来越丰富，人们在甄选的同时对其安全性的争论也变得尤为激烈，因此，急需一种集简单、快速和便捷的检测方法对转基因产物进行鉴别。重组酶聚合酶恒温扩增技术（recombinase polymerase amplification， RPA）是核酸检测技术发展的新方向，它可以在恒定温度下进行扩增反应，实现在体外扩增目的核酸片段。该技术反应迅速，特异性强且灵敏度较高，满足市场的需求。因此，本研究利用重组酶聚合酶恒温扩增技术针对编码抗虫蛋白的苏云金芽孢杆菌基因（Bacillus thuringiensis， Bt）进行检测，通过设计并优化引物，对不同反应时间和反应温度进行选择，最终建立最优的反应体系，确定最佳反应时间30 min及温度38 ℃，优化后反应体系灵敏度可达6 fg，特异性良好。
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