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采集不同生境的药用植物蛇足石杉，运用不同灭菌方法处理外植体，并用PDA平板培养基及孟加拉红培养基进行内生真菌的分离纯化．经过几种灭菌方法的摸索和比较研究．发现蛇足石杉外植体的灭菌十分困难（尤其是其茎部），难以在保持植物鲜活状态下达到一次彻底灭菌，有必要二次灭菌．通过二次灭菌分离得到的9株内生真菌中，来自蛇足石杉茎部的6株，来自叶片的3株．蛇足石杉的9株内生真菌在平板培养时生长极其缓慢,仅一株可在培养时产生孢子.