三七总皂苷对肺癌A549细胞上皮间质转化的抑制作用

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目的观察三七总皂苷(PNS)对体外经转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肺腺癌A549细胞后发生上皮细胞间质化(EMT)的作用。方法首先进行PNS MTT实验,然后再进行PNS干预EMT实验,将A549细胞随机分为5组:空白组加入F-12培养基,模型组及低、中、高浓度中药组分别加入10 ng/mL TGF-β1和62.5、125、250μg/mL PNS,继续培养72 h。采用光学显微镜观察各组细胞的形态变化,采用实时荧光定量PCR、Western Blot及免疫荧光技术检测纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)、E-钙黏素(E-Cad)mRNA及蛋白表达水平。结果 31.25~500μg/mL PNS对A549细胞无明显增殖作用。与空白组比较,模型组FN mRNA及蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),Vim蛋白表达升高(P<0.05),E-Cad mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,高浓度中药组FN mRNA表达降低(P<0.05),E-Cad及蛋白mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05);低浓度、高浓度中药组FN蛋白表达降低(P<0.05),低、中浓度中药组Vim蛋白表达降低(P<0.05)。结论 PNS体外干预可提高EMT过程中上皮标志物E-Cad并抑制间质标志物FN、Vim的表达,高浓度时结果更为显著,对EMT过程有一定的干预作用。
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