一氧化氮介导的线粒体损害诱发败血症肝功衰竭的研究

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目的 通过检测败血症大鼠分离肝细胞一氧化氮(NO)的产生,探讨NO对肝细胞功能障碍的影响.方法 将大鼠分成盲肠结扎穿刺手术组(CLP组)和假手术对照组(Sham组),采用胶原酶灌注法分离剩余肝细胞并进行培养;应用白细胞介素(IL)-1β等细胞因子处理培养肝细胞;应用Griess reagent法检测CLP组和Sham组肝细胞NO的产生量;应用Western blot检测两组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的产生;应用高效液相色谱法测定两组肝细胞核苷酸含量;应用酶法检测两组肝细胞的酮体含量并计算酮体比率(乙酰乙酸盐/β-羟基丁酸盐,KBR).结果 CLP组肝细胞NO的产生量是对照组的2~3倍.IL-1β能够降低两组肝细胞的ATP含量和酮体比率,CLP组降低程度大于对照组.加入L-精氨酸(L-Arg),CLP组肝细胞一氧化氮的产生增加,ATP水平和KBR降低.一氧化氮合酶(NOS)抑制剂NG-甲基-L-精氨酸(L-NMMA)可以抑制NO的产生,并使降低的肝细胞ATP含量、KBR得以恢复.结论 对败血症的应答导致NO合成的增加可能与败血症大鼠肝功能障碍有关.对NO产生的调节可能会成为预防败血症所致肝功能障碍的有效方法.
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