【摘 要】
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研究重组肝靶向干扰素工程菌菌株的遗传稳定性,为重组肝靶向干扰素产业化提供依据。在有选择压力(Amp+)条件下,采用平板划线传代法,将重组肝靶向干扰素工程菌菌株连续传代50
【机 构】
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广东药学院药用生物活性物质研究所,广东省生物活性药物研究重点实验室
【基金项目】
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国家科技部新药创制重大专项资助项目(2013ZX09103003-003)
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研究重组肝靶向干扰素工程菌菌株的遗传稳定性,为重组肝靶向干扰素产业化提供依据。在有选择压力(Amp+)条件下,采用平板划线传代法,将重组肝靶向干扰素工程菌菌株连续传代50代,观察菌落和菌体形态,进行生长速度、质粒稳定性、PCR鉴定、限制性内切酶酶切图谱、测序和表达量检测。结果显示:此工程菌在连续传代过程中,保持了大肠杆菌的典型特征,生长速度与原始种子库无明显差异;各代质粒的PCR和酶切图谱正确,传50代后质粒稳定性接近100%,DNA测序未见基因变异。重组肝靶向干扰素表达水平及菌体蛋白的SDS-PAGE图谱均无显著差异。说明肝靶向干扰素工程菌株具有良好的遗传稳定性,为重组肝靶向干扰素的应用奠定了基础。
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