【摘 要】
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目的：构建人乳头瘤病毒16型（HPV-16）E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法：人工合成HPV16E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16E7基因,并克隆
【机 构】
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吉林大学白求恩医学院病原生物学系,吉林大学白求恩医学院分子生物学系
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目的：构建人乳头瘤病毒16型（HPV-16）E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法：人工合成HPV16E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16-E7。将其转化到工程菌Rosetta后,经IPTG诱导表达,进行E7-GST融合蛋白的SDS-PAGE分析和Ni 2^＋-NTA亲和层析纯化。结果：E7基因PCR扩增产物和重组表达质粒的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见300bp的目的基
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