携胰岛素调控基因系统的载体构建及鉴定

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目的:构建受胰岛素、葡萄糖双向调节的胰岛索分泌调控基因的载体。方法:1.用酚氯仿抽提法提取SD大鼠肝脏基因组DNA,用P1、P2为引物。PCR扩增胰岛素生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1);2.选用pUC118作为克隆载体,用分子克隆技术亚克隆三倍体葡萄糖反应元件(GLRE)3;3,运用基因重组技术将ICFBP-1启动子定向插入(GLRE)3的下游。结果:1.PCR扩增出420bp的目的DNA片断,与文献IGFBP-1 DNA大小一致;2.重组体序列分析显示,克隆的基因序列和文献报道的(GLRE)
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