重组质粒pCR3．1-brZPC’的构建及其体内外表达

来源 :生殖医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：icefireren

【摘要】

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目的构建重组质粒pCR3.1-brZPC',检验其在细胞及动物体内的表达. 方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法克隆基因,与真核表达载体pCR3.1相连,转化感受态菌后酶切鉴定重组

【作者】

：

徐丽彭景楩

【机构】

：

中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室

【出处】

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生殖医学杂志

【发表日期】

：

2003年6期

【关键词】

：

卵透明带 DNA疫苗抗体免疫荧光法重组质粒 pCR3.1-brZPC’ 基因表达 RT-PCR法 Zona pellucida DNA vaccine A

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目的构建重组质粒pCR3.1-brZPC',检验其在细胞及动物体内的表达. 方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法克隆基因,与真核表达载体pCR3.1相连,转化感受态菌后酶切鉴定重组质粒.脂质体法转染Hela细胞,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA水平的表达;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白水平的表达.接种BALB/c小鼠,一周后提取其各组织的总RNA,RT-PCR检测重组质粒在被免疫动物体内mRNA水平的表达情况. 结果重组质粒pCR3.1-brZPC'能在细胞和被免疫动

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