【摘 要】
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以黑曲霉ZM-8基因组为模板,设计了含有6×His标签和胶原蛋白酶识别位点序列的上游引物及下游引物,通过聚合酶链式反应扩增获得葡萄糖氧化酶(GOD)基因,并与Smal酶切平末端pUC1
【基金项目】
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兰州理工大学博士启动基金;兰州理工大学重点学位课程建设专项项目
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以黑曲霉ZM-8基因组为模板,设计了含有6×His标签和胶原蛋白酶识别位点序列的上游引物及下游引物,通过聚合酶链式反应扩增获得葡萄糖氧化酶(GOD)基因,并与Smal酶切平末端pUC19载体连接,对蓝白斑筛选获得的重组子进行酶切鉴定及测序分析,表明该基因(HQ269422.1)大小为1749bp,编码583个氨基酸.用限制性内切酶Notl切下目的基因,插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成表达载体pfIC9K-HisGOD.该重组毕赤酵母表达载体的构建,有望获得高分泌表达、便于纯化的高活性葡萄糖氧化酶,为研制高品质的酶制剂奠定基础.
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