【摘 要】
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为制备猪瘟病毒(CSFV)特异性诊断抗原,根据国内CSFV流行毒株的序列合成了其主要的保护性抗原Erns蛋白的基因序列,将合成的基因按设计的酶切位点与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,
【机 构】
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甘肃农业大学,河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室
【基金项目】
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国家“863”计划项目(2007AA100606)
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为制备猪瘟病毒(CSFV)特异性诊断抗原,根据国内CSFV流行毒株的序列合成了其主要的保护性抗原Erns蛋白的基因序列,将合成的基因按设计的酶切位点与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-Erns。用SalⅠ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌。经筛选、鉴定,成功获得了表达CSFV的Erns蛋白的阳性重组酵母菌。该阳性重组酵母菌经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白。Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别CSFV抗体,且具有很好的反应原性。
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