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目的:建立测定复杂用药环境下人血清中替考拉宁浓度的反相高效液相色谱法。方法:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.02 mol·L-1的Na H2PO4溶液(24:76,V/V,H3PO4调p H值为2.02),流速1.0 m L·min-1,检测波长240 nm,柱温28℃。结果:替考拉宁在2.01~80.67μg·m L-1(r=0.998 9,n=7)范围内浓度与校正因子f(替考拉宁峰面积/哌拉西林的峰面积)成良好的线性关系,定量限为50.5 ng,替考拉宁平均提取回收率为87.17%,方法平均回收率为100.7%,(RSD=1.93%,n=9)。结论:该法操作简便、灵敏、准确,适用于替考拉宁血药浓度的测定。