论文部分内容阅读
目的
研究细胞外高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）诱导人正常支气管上皮细胞（NHBE）炎性反应的作用机制。
方法实验分组为空白对照组、HMGB-1组、HMGB-1+RAGE抗体（RAGE-Ab）组、HMGB-1+JNK抑制剂SP600125组、RAGE-Ab组。采用免疫荧光技术分析RAGE蛋白的表达；ELISA实验检测NHBE细胞上清液中的炎性细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10和MCP-1的水平；采用蛋白免疫印迹分析RAGE、p-JNK和p-NF-κB p65蛋白的表达。
结果HMGB-1能剂量依赖性的诱导RAGE蛋白的表达。在浓度为5和10 μg/ml时，与空白对照组相比HMGB-1能显著增加荧光的强度（P<0.05），HMGB-1+RAGE-Ab组RAGE表达显著下降（P<0.05），而HMGB-1+SP600125组RAGE蛋白的表达没有显著变化。与空白对照组相比，用HMGB-1处理后TNF-α、IL-8、IL-10和MCP-1的水平均显著增加（均P<0.05），HMGB-1+RAGE-Ab组和HMGB-1+SP600125组各炎性因子的释放均显著下降（均P<0.05）。与空白对照组比较，用HMGB-1处理NHBE细胞后RAGE、p-JNK和p-NF-κB p65蛋白表达呈现剂量依赖性增加（P<0.05），HMGB-1+RAGE-Ab组中RAGE、p-JNK和p-NF-κB p65蛋白的表达显著下降（P<0.05），而HMGB-1+SP600125组中p-JNK和p-NF-κB p65蛋白的表达显著下降（P<0.05），但RAGE的表达没有显著变化。
结论NHBE细胞中HMGB-1诱导的炎性反应是通过RAGE/JNK/NF-κB信号通路介导的。