【摘 要】
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目的分析甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate，GMA)致人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化过程中不同时点阿片样物质结合蛋白／细胞黏附分子样蛋白(opioid binding protein/cell adhesion molecule-like，OPCML)基因甲基化状态，探讨其在GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中OPCML基因甲基化状态的变化及其意义。方法收获G
【机 构】
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100050北京,中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室100050北京,中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所质量控制室
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目的：分析甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl mcthacrylatc,GMA)致人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化过程中不同时点阿片样物质结合蛋白/细胞黏附分子样蛋白(opioid binding protein/cell adhesion molecule-like,OPCML)基因甲基化状态,探讨其在GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中OPCML基因甲基化状态的变化及其意义.
方法：收获GMA第10、20、30代16HBE细胞,应用甲基化芯片和甲基化特异性PCR(methylation-specific-PCR,MSP)技术检测OPCML基因在GMA诱导16HBE细胞恶性转化不同时点甲基化状态,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测该基因在不同转化时点基因表达量,并与同期DMSO溶剂对照组细胞比较.
结果：甲基化芯片结果显示,GMA染毒组16HBE细胞在第10、20、30代OPCML基因均发生甲基化,对照组均未发生甲基化,且MSP法检测结果与芯片结果一致.qPCR结果显示,与同期溶剂对照组相比,GMA染毒组16HBE细胞在第20、30代OPCML基因表达量均下调,经甲基化转移酶抑制剂(5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,15-Aza-cdr)处理后,该基因与同代龄GMA组细胞相比,表达量水平上升,差异有统计学意义(P值分别为0.004、0.001、0.001).
结论：OPCML基因可能作为GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化的一个特异指标.
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