【摘 要】
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本研究旨在克隆猪转录因子ELF4基因,体外表达ELF4蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体。采用RTPCR扩增猪ELF4基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列特征,将其克隆
【机 构】
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南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室,衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所
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本研究旨在克隆猪转录因子ELF4基因,体外表达ELF4蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体。采用RTPCR扩增猪ELF4基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列特征,将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达载体pET28a-pELF4,转化Rosetta（DE3）菌株,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达,重组pELF4蛋白（rpELF4）经纯化免疫鸡制备抗pELF4抗体。结果表明,pELF4开放阅读框为1 989
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