三尖杉酯碱对HL60细胞动粒蛋白B基因表达的影响

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为了了解三尖杉酯碱(HT)对白血病癌细胞杀伤的分子机制,用间接免疫荧光、免疫印迹、分子杂交和点杂交的方法探讨了HT的抗急性粒细胞白血病HL-60效应和动粒/着丝粒蛋白之间的关系,结果显示:(1)抗动粒抗体(anticentromereantibody,ACA)血清的间接免疫荧光染色法显示,HL60细胞中动粒荧光斑点随HT作用时间延长而减弱,表明细胞内动粒蛋白含量降低。(2)Westernblot法显示,ACA血清能识别HL60细胞中6种分子量大小不同的动粒蛋白:140kD、80kD、70kD、56kD、52kD和17kD。HT降低140kD、80kD、70kD、56kD4种动粒蛋白的含量,HT作用24h后,几乎检测不到140kD和70kD2种动粒蛋白的存在,80kD和56kD2种动粒蛋白的含量也急剧下降。而52kD和17kD2种动粒蛋白的含量则保持相对稳定。(3)HT抑制HL60细胞中CENP-B基因的表达,在对照细胞中,CENP-B基因表达水平较高,HT作用6h后,CENP-B基因的表达就受到严重抑制,表达水平急剧下降。结果表明,HT处理能够导致某些动粒蛋白含量的降低,而且这种作用可能是通过抑制基因表达来?
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