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采用多重PCR的方法,以快速扩增微卫星标记和节约试剂为目标,对其反应条件进行优化后,获得了46个扩增效果理想的微卫星标记多重PCR组合,其中30个为二重PCR,16个为三重PCR.实验结果表明,这些多重PCP反应的引物浓度为0.06～O.3μmol/L,Mg2+的浓度变化范围为1.5～3.0mmol/L,采用的PCR缓冲液的倍数为1.0、1.2、1.4或1.6,每个PCR反应聚合酶的用量在O.2和O.4U之间,退火温度及反应循环数分别为52～60℃和32～50℃.所有多重PCR进一步合并为17个可在ABI 337测序仪上进行电泳的组合.