【摘 要】
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目的应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段.方法构建含有汉滩病毒G1S0.7嵌合基因的杆状病毒表达载体pFBD-G1S0.7,转化DH10Bac致敏菌
【机 构】
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第四军医大学微生物学教研室,西安,710032
【基金项目】
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教育部高校骨干教师资助计划;国家自然科学基金
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目的应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段.方法构建含有汉滩病毒G1S0.7嵌合基因的杆状病毒表达载体pFBD-G1S0.7,转化DH10Bac致敏菌,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上,快速筛选出含有G1S0.7嵌合基因的重组杆状病毒,在昆虫细胞中表达该融合蛋白,利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测.结果构建的含G1S0.7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别,表达产物主要集中在细胞内.结论在昆虫细胞中表达出具有生物学活性的G1S0.7融合蛋白,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础.
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