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研究过表达蛋白磷酸酶2A的调节亚基B'α对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响。
方法通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A表达;用慢病毒载体构建稳定过表达PPP2R3A的肝癌细胞系(Huh-7和HepG2);通过CCK-8、流式细胞仪、transwell小室实验分别检测稳转肝癌细胞系增殖、周期、凋亡以及侵袭转移的生物学行为的改变,并构建裸鼠皮下瘤模型验证肝癌细胞生长情况。计量资料组间比较用t检验。
结果人肝癌癌组织中PPP2R3A基因的表达高于癌旁;过表达PPP2R3A基因后,肝癌细胞的吸光度值(A值)增加(P < 0.05);细胞周期G1期向S期转换显著增多,即细胞周期G1期减少(Huh-7:t = 3.04,P = 0.038 4;HepG2:t = 4.06,P = 0.015 3),S期增多(Huh-7:t = 3.47,P = 0.025 5;HepG2:t = 4.46,P = 0.011 2);早期凋亡率减少(Huh-7:t = 7.34,P = 0.001 8;HepG2:t = 4.06,P = 0.015 3);Huh-7细胞中,迁移到下室的数目明显增多(t = 3.18,P = 0.033 4),铺上基质胶后到达下室的细胞数目同样增多(t = 2.84,P = 0.046 4);动物实验结果显示其过表达组的裸鼠皮下瘤生长显著增加(t = 4.31,P = 0.003 5)。蛋白质印迹法实验结果显示剪切体的PARP和P53蛋白表达减少,而β-catenin蛋白在肝癌细胞的积累增多。
结论过表达PPP2R3A基因可能促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,抑制凋亡,诱导G1/S期转换,参与影响肝癌细胞生物学行为。