【摘 要】
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目的采用RT-PCR原理,建立有良好敏感性与可重复性的逆转录酶活性检测方法,用于组织细胞中逆转录酶活性的检测。方法以MS2噬菌体RNA为模板,设计一对引物,采用逆转录酶催化合成
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院; 成都康华生物制品有限公司;
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目的采用RT-PCR原理,建立有良好敏感性与可重复性的逆转录酶活性检测方法,用于组织细胞中逆转录酶活性的检测。方法以MS2噬菌体RNA为模板,设计一对引物,采用逆转录酶催化合成cDNA后再用Taq DNA聚合酶进行PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测有无特异大小的目的条带出现,从而确定样品是否具有逆转录酶活性。结果所建立的逆转录酶活性检测方法检出限为2×10-4U,目的条带为308 bp。经琼脂糖电泳能较好的观察判断,送检组织细胞培养液与裂解上清液样品均未检出逆转录酶活性阳性。结论所建立的方法能有效地用于组织细胞培养中逆转录酶活性的检测。
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