荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶抗血清的制备及抗体效价检测

来源 :四川动物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjso579202

【摘要】

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目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶（MpCHI786）的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方

【作者】

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陆雪莹李洁琼庄淑珍刘小宁马纪

【机构】

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新疆大学生命科学与技术学院

【出处】

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四川动物

【发表日期】

：

2014年5期

【关键词】

：

小胸鳖甲几丁质酶 DNA-蛋白质联合免疫抗血清抗体效价 Microdera punctipennis chitinase DNA prime-pr

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（31360527）,新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题（XJDX0201-2014-03）

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目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶（MpCHI786）的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方法从小胸鳖甲成虫中提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增Mpchi786 cDNA,构建原核表达载体pET30a-Mpchi786,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达获得融合蛋白His-MpCHI786。对融合蛋白切胶纯化后与弗氏佐剂混合作为抗原。另外,构建真核表达质粒pcDNA3.0-Mpchi786,对小鼠尾静脉高压注射,

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