【摘 要】
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目的 应用一步法Real - time RT - PCR检测不同载体转染HepG2细胞沉默人类白细胞抗原-E (HLA -E)基因的效率.方法 分别用Gal - PEG - PEI/psiRNA、Gal - PEG - PEI/NC - psi
【机 构】
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河南省肿瘤医院肝胆胰外科,中山大学附属第三医院肝移植中心
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目的 应用一步法Real - time RT - PCR检测不同载体转染HepG2细胞沉默人类白细胞抗原-E (HLA -E)基因的效率.方法 分别用Gal - PEG - PEI/psiRNA、Gal - PEG - PEI/NC - psiRNA、PEG - PEI/psiRNA、Lipofectamine 2000/psiRNA、裸psiRNA转染HepG2细胞,提取细胞总RNA,一步法Real - time RT - PCR检测HLA -E基因沉默前后mRNA表达水平.结果 Gal - PEG - PEI组对HLA -E基因的沉默效率为55％,显著高于PEG - PEI组、Lipofectamine2000组、裸psiRNA组和阴性对照组(P＜0.01).Gal-PEG-PEI组的沉默作用可持续7d.结论 经一步法Real - time RT - PCR检测,Gal - PEG - PEI/psiRNA纳米粒对HepG2细胞HLA-E基因有较高的沉默效率.
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