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摘 要 回顾大动物门脉高压模型的研究进展，分析不同制备方法的优缺点，以期对大动物门脉高压模型的研究有所帮助。
关键词 门静脉高压 动物模型 文献综述
一种理想的大动物门脉高压动物模型，对于评价外科治疗效果及临床基础研究，具有不可忽视的作用，但目前尚没有一种较理想的大动物门脉高压模型制备方法。
肝前型门脉高压模型的制作
门-腔静脉吻合制作模型。门-腔静脉吻合法：是通过将动物下腔静脉与门静脉吻合，制作门静脉高压模型。1976年Saku等提出用血流量较大的下腔静脉与门静脉吻合制作犬门静脉高压症模型，但效果不理想。Dennis将下腔静脉和门静脉主干行侧侧吻合，于吻合口上方的门静脉内置入1个含琼脂环的钢圈起固定作用，并在下腔静脉与门静脉的吻合口上方双重结扎腔静脉，使其腔静脉下方的血液完全注入门静脉系统。此法3～6周后全部成模，无死亡。门静脉压力明显增高，食管胃底静脉丛呈不同程度曲张，肝脏组织学改变不明显。该模型为食管胃底静脉曲张及内窥镜注射硬化剂治疗出血的研究提供了便利条件。2003年徐氏［1］等采用改良Stiegmann方法，对实验犬门静脉结扎，使门静脉管径缩小40%~60%，同时在肾上水平横断下腔静脉，近端关闭，远端与门静脉行端侧吻合。建立稳定的门静脉高压食管静脉曲张动物模型后，门静脉压力由140mm构橼酸葡萄糖柱上升到326mm构橼酸葡萄糖柱。
缩窄门静脉主干制作模型。缩窄门静脉主干法：采用缩窄门静脉主干制作门脉高压模型。具体是将门静脉游离，把1个20号钝头直针纵向置于门静脉主干旁，用0～3号丝线把门静脉与直针一并结扎2道，第1道位于门静脉主干近左、右分支处，第2道位于与脾静脉交接处下方，结扎后抽出直针，关腹。术后10～15天可全部成模，且无死亡。国内学者李氏等［3］对健康成年犬，通过行缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术，建立犬肝前性门静脉高压症（PHT）模型。
肝硬化型门脉高压模型的制作
四氯化碳（CCL4）诱导肝硬化门脉高压模型：苯巴比妥可使细胞色素P-450活性增强，滑面内质网增生。细胞色素P-450是肝微粒体最重要的药物代谢酶，故合用苯巴比妥可增加肝细胞对CCL4的敏感性。
二甲基亚硝胺（DMNA）诱导肝硬化门脉高压模型：DMNA主要在肝内微粒体药物氧化酶系统进行氧化代谢激活，即由DMNA去甲基酶激活而进行氧化，如N-脱羟基生成甲醛，或产生活性甲基和酯酰烷基亚硝胺，后者再氧化成甲烷亚硝胺。由于这些中间代谢产物与机体组织中各种生物大分子物质如结构蛋白、血清蛋白、酶和核酸（包括DNA和RNA）等结合，改变其正常的理化特性和生物学活性，导致肝细胞坏死，造成弥漫性、特异性损害。DMNA制备肝硬化模型稳定，呈进行性肝损害，与人类肝硬化特征相似，国外尚有报道用该模型进行肝硬化机制及筛选抗纤维化药物的研究。
胆总管结扎致胆汁性肝硬化模型（BCM）：BCM法是通过结扎、切断动物的肝总管，造成胆道完全梗阻、胆汁排出受阻、胆管压力增高、肝内胆汁瘀积，从而引起肝细胞分泌功能障碍，导致肝细胞坏死、增生，肝硬化形成。
门静脉末梢栓塞制备门脉高压
该模型适合于窦前型肝硬变与肝硬变血流动力学改变及门体分流的研究。1985年大西久仁彦等用大肠杆菌成功复制出犬静脉高压症模型。他们采取以1%福尔马林杀死非致病性大肠杆菌，再将其煮沸2.5小时，使其只具有O抗原；将2mg此种蛋白与1mlFreund佐剂行肌肉注射，2周后制得效价为1∶512～1∶1024的O抗体血清，将该血清和被杀死的大肠杆菌1.5mg/ml以2∶3的比例混后置于50℃培养箱内孵育2小时，再把此种混合液由肠系膜上静脉插管注入到门静脉，剂量为4ml/kg，2周内注入7～10次，1个月后再注入1次，2.5个月后即可成模。成模后门静脉压力显著增高。病理示门静脉末梢纤维化、萎缩及狭窄。该模型适用于特发性门静脉高压症的研究。国内学者陈军等采用葡聚糖微球制成猪门静脉高压症模型。实验猪选取左上腹肋缘下斜切口，进腹后寻找脾静脉分支，置入16GF单腔静脉导管，在DSA机下调整导管至门静脉主干。妥善固定导管，逐层关腹。导管另戳孔引出，位置平腰椎上缘。通过单腔静脉导管注射葡聚糖微球，葡聚糖微球应用按10m/kg体重，5天1次，共4次。术后常规喂养。注射葡聚糖微球前后分别测定门静脉压力，同时作肝功能检查。门静脉的基础压力为9.33±0.33cmH2O，术后第22天压力为24.17±2.24cmH2O，与门静脉基础压力相比差异有统计学意义（P<0.01）。门脉高压症形成后（术后第22天），开腹取肝脏做病理学检查。
肝后型门脉高压模型的制作
肝后型门脉高压大动物模型目前制作的人较少。其方法是：选取健康无病的华北家犬3只，分别标号，将实验前各项观察指标测定记录完备后，全麻下开腹探查记录肝脾大小门脉系统各血管形态，测定门静脉压力。充分显露第二肝门，将肝左、中、右三条出肝静脉在下腔静脉进入下腔入口处平面分别结扎，人工造成急性布德恰锐氏综合征。关腹后，使狗处于麻醉状态下，每小时重复检测各项指标1次。
参考文献
1 徐辉，陈虹彬，蒋明德，等.合金支架治疗食管静脉曲张出血的实验研究.西南国防医药，2003，13(4)：358-360.
2 李宗芳，刘效恭，王英.缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术制备犬门静脉高压症模型.中华实验外科杂志，1997，14：314-315.
3 李晓青，董蕾罗，金燕.不同静脉灌注量对门静脉高压失血性休克犬血流动力学的影响.中华肝脏病杂志，2002，10(5)：374-377.
关键词 门静脉高压 动物模型 文献综述
一种理想的大动物门脉高压动物模型，对于评价外科治疗效果及临床基础研究，具有不可忽视的作用，但目前尚没有一种较理想的大动物门脉高压模型制备方法。
肝前型门脉高压模型的制作
门-腔静脉吻合制作模型。门-腔静脉吻合法：是通过将动物下腔静脉与门静脉吻合，制作门静脉高压模型。1976年Saku等提出用血流量较大的下腔静脉与门静脉吻合制作犬门静脉高压症模型，但效果不理想。Dennis将下腔静脉和门静脉主干行侧侧吻合，于吻合口上方的门静脉内置入1个含琼脂环的钢圈起固定作用，并在下腔静脉与门静脉的吻合口上方双重结扎腔静脉，使其腔静脉下方的血液完全注入门静脉系统。此法3～6周后全部成模，无死亡。门静脉压力明显增高，食管胃底静脉丛呈不同程度曲张，肝脏组织学改变不明显。该模型为食管胃底静脉曲张及内窥镜注射硬化剂治疗出血的研究提供了便利条件。2003年徐氏［1］等采用改良Stiegmann方法，对实验犬门静脉结扎，使门静脉管径缩小40%~60%，同时在肾上水平横断下腔静脉，近端关闭，远端与门静脉行端侧吻合。建立稳定的门静脉高压食管静脉曲张动物模型后，门静脉压力由140mm构橼酸葡萄糖柱上升到326mm构橼酸葡萄糖柱。
缩窄门静脉主干制作模型。缩窄门静脉主干法：采用缩窄门静脉主干制作门脉高压模型。具体是将门静脉游离，把1个20号钝头直针纵向置于门静脉主干旁，用0～3号丝线把门静脉与直针一并结扎2道，第1道位于门静脉主干近左、右分支处，第2道位于与脾静脉交接处下方，结扎后抽出直针，关腹。术后10～15天可全部成模，且无死亡。国内学者李氏等［3］对健康成年犬，通过行缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术，建立犬肝前性门静脉高压症（PHT）模型。
肝硬化型门脉高压模型的制作
四氯化碳（CCL4）诱导肝硬化门脉高压模型：苯巴比妥可使细胞色素P-450活性增强，滑面内质网增生。细胞色素P-450是肝微粒体最重要的药物代谢酶，故合用苯巴比妥可增加肝细胞对CCL4的敏感性。
二甲基亚硝胺（DMNA）诱导肝硬化门脉高压模型：DMNA主要在肝内微粒体药物氧化酶系统进行氧化代谢激活，即由DMNA去甲基酶激活而进行氧化，如N-脱羟基生成甲醛，或产生活性甲基和酯酰烷基亚硝胺，后者再氧化成甲烷亚硝胺。由于这些中间代谢产物与机体组织中各种生物大分子物质如结构蛋白、血清蛋白、酶和核酸（包括DNA和RNA）等结合，改变其正常的理化特性和生物学活性，导致肝细胞坏死，造成弥漫性、特异性损害。DMNA制备肝硬化模型稳定，呈进行性肝损害，与人类肝硬化特征相似，国外尚有报道用该模型进行肝硬化机制及筛选抗纤维化药物的研究。
胆总管结扎致胆汁性肝硬化模型（BCM）：BCM法是通过结扎、切断动物的肝总管，造成胆道完全梗阻、胆汁排出受阻、胆管压力增高、肝内胆汁瘀积，从而引起肝细胞分泌功能障碍，导致肝细胞坏死、增生，肝硬化形成。
门静脉末梢栓塞制备门脉高压
该模型适合于窦前型肝硬变与肝硬变血流动力学改变及门体分流的研究。1985年大西久仁彦等用大肠杆菌成功复制出犬静脉高压症模型。他们采取以1%福尔马林杀死非致病性大肠杆菌，再将其煮沸2.5小时，使其只具有O抗原；将2mg此种蛋白与1mlFreund佐剂行肌肉注射，2周后制得效价为1∶512～1∶1024的O抗体血清，将该血清和被杀死的大肠杆菌1.5mg/ml以2∶3的比例混后置于50℃培养箱内孵育2小时，再把此种混合液由肠系膜上静脉插管注入到门静脉，剂量为4ml/kg，2周内注入7～10次，1个月后再注入1次，2.5个月后即可成模。成模后门静脉压力显著增高。病理示门静脉末梢纤维化、萎缩及狭窄。该模型适用于特发性门静脉高压症的研究。国内学者陈军等采用葡聚糖微球制成猪门静脉高压症模型。实验猪选取左上腹肋缘下斜切口，进腹后寻找脾静脉分支，置入16GF单腔静脉导管，在DSA机下调整导管至门静脉主干。妥善固定导管，逐层关腹。导管另戳孔引出，位置平腰椎上缘。通过单腔静脉导管注射葡聚糖微球，葡聚糖微球应用按10m/kg体重，5天1次，共4次。术后常规喂养。注射葡聚糖微球前后分别测定门静脉压力，同时作肝功能检查。门静脉的基础压力为9.33±0.33cmH2O，术后第22天压力为24.17±2.24cmH2O，与门静脉基础压力相比差异有统计学意义（P<0.01）。门脉高压症形成后（术后第22天），开腹取肝脏做病理学检查。
肝后型门脉高压模型的制作
肝后型门脉高压大动物模型目前制作的人较少。其方法是：选取健康无病的华北家犬3只，分别标号，将实验前各项观察指标测定记录完备后，全麻下开腹探查记录肝脾大小门脉系统各血管形态，测定门静脉压力。充分显露第二肝门，将肝左、中、右三条出肝静脉在下腔静脉进入下腔入口处平面分别结扎，人工造成急性布德恰锐氏综合征。关腹后，使狗处于麻醉状态下，每小时重复检测各项指标1次。
参考文献
1 徐辉，陈虹彬，蒋明德，等.合金支架治疗食管静脉曲张出血的实验研究.西南国防医药，2003，13(4)：358-360.
2 李宗芳，刘效恭，王英.缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术制备犬门静脉高压症模型.中华实验外科杂志，1997，14：314-315.
3 李晓青，董蕾罗，金燕.不同静脉灌注量对门静脉高压失血性休克犬血流动力学的影响.中华肝脏病杂志，2002，10(5)：374-377.