论文部分内容阅读
目的建立人脂联素球状结构域（gAd）融合组氨酸标签的原核高效表达体系，并分离纯化gAd。方法从淋巴细胞中提取人基因组DNA，PCR扩增出含有脂联素编码序列的片段，经T-A克隆入pMD18-T载体中，然后设计适当的引物，引入起始密码、C端连续6个组氨酸编码序列、终止密码以及相应的酶切位点，把脂联素球状结构域（gAd）基因亚克隆到表达载体pBV220，将序列鉴定正确的重组质粒转化人大肠杆菌DH5α中，用42℃温控诱导表达目的蛋白。结果在大肠杆菌中成功实现了gAd稳定高效表达，表达产物以包涵体形式存在，表达量约