【摘 要】
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利用pGR202和pBin19两种质粒经过pB I 222的改建,含有CaMV35S启动子和Nos终止子的CN区DNA片段与pBin19的Bin区DNA片段的不对称连接和目的基因GR的cDNA重组于真核表达双元载体
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利用pGR202和pBin19两种质粒经过pB I 222的改建,含有CaMV35S启动子和Nos终止子的CN区DNA片段与pBin19的Bin区DNA片段的不对称连接和目的基因GR的cDNA重组于真核表达双元载体三步亚克隆,筛选出一正向插入的谷胱甘肽还原酶基因的真核表达双元载体质粒pBin-CN-GR。再利用此质粒转化的农杆菌LBA4404进行马铃薯的遗传转化,并分化出卡那霉素抗性苗。过氧化物同工酶和酯酶同工酶谱带显示转化材料与对照之间存在显著的差异,表明转化材料的基因表达发生了变化。对转化影响因素的研究发现培养基的组成成分、选择压(Km)添加浓度及加入时机是影响转化率的重要因素。
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