近年来,从鸭群中分离到一种造成鸭生长迟缓的新病毒,为了解该病毒在鸭群中的感染率和在我国的分布范围,急需要建立一种检测该病毒血清抗体的方法。本研究以引起鸭生长迟缓病毒毒株Anhui2病毒为抗原免疫小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得2株能够稳定分泌抗该病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1-5和3-6G),并且都两株单抗均可以中和鸭生长迟缓病毒株Anhui2株。在此基础上,利用特异性单抗1-5和Anhui2病毒抗原建立了检测这种病毒抗体的阻断ELISA方法,并确定了抗原和抗体的最适条件。对316份阴性血清检测结果进行统计学分析,确定本方法的判定标准为当阻断率PI≥26.0%时判为抗体阳性,PI≤17.9%时判定抗体阴性,17.9%<PI<26.0%时判为可疑,需重复检测1次,如果仍低于26.0%,则判为抗体阴性。应用该方法对Ⅰ型鸭肝炎病毒、Ⅲ型鸭肝炎病毒、禽流感病毒、鸭瘟病毒、鸭呼肠孤病毒、新型鸭细小病毒、番鸭呼肠孤病毒、鸭坦布苏病毒阳性血清和4份鸭阴性质控血清检测,结果证明该方法具有良好的特异性和敏感性,可用于鸭生长迟缓病毒病流行病学调查和疾病诊断。