基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术分析痔血安合剂的化学成分与小鼠口服后的入血成分

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目的:运用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术分析鉴定痔血安合剂的化学成分,以及小鼠灌胃后主要入血成分。方法:取健康雄性C57/BL6J小鼠9只,分为空白组(3只)和痔血安合剂组(6只),空白组灌胃超纯水,痔血安合剂组按27.2 mL·kg-1剂量灌胃痔血安合剂,分别在给药后1 h、3 h各处理3只,收集血清,采用蛋白沉淀的方法进行样品前处理。色谱分离采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相体系,梯度洗脱。质谱采用正负离子一级全扫描/数据依赖二级扫描模式(Full MS/dd-MS2)模式,一级全扫描设置分辨率70 000,二级设置分辨率17 500,隔离窗口1 m/z,归一化碰撞能量(NCEs)为10%、20%和40%采集原方及血清样本数据。经Xcalibur 3.0软件获取色谱保留时间以及母离子和碎片离子信息,通过对照品比对、文献参考相关等成分检测信息,实现对痔血安合剂化学成分及入血原型的鉴定。结果:本研究从痔血安合剂中共鉴定出207种化学成分,包括黄酮类84种、萜(皂苷)类41种、生物碱类16种、有机(酚)酸类26种、苯酞类13种、色原酮类9种、苯乙醇苷类4种、香豆素类4种、木酯素类3种、苯丙素类2种及其他类5种。小鼠口服痔血安合剂后血清中检测到52种原型成分。结论:该研究利用高分辨质谱技术完成了痔血安合剂化学成分及主要入血成分的快速鉴定,可为痔血安合剂效应物质的解析及作用机制研究提供部分参考。
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