【摘 要】
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目的构建人原发性肝细胞癌(HCC)消减杂交文库,筛选差异表达基因.方法以癌组织为检测者(tester)、癌旁组织为参照者(driver),应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建消减杂交cDNA文
【机 构】
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北京大学人民医院肝胆外科中心,北京大学人民医院中心实验室
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目的构建人原发性肝细胞癌(HCC)消减杂交文库,筛选差异表达基因.方法以癌组织为检测者(tester)、癌旁组织为参照者(driver),应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建消减杂交cDNA文库,随机挑选56个阳性克隆进行鉴定、测序及同源性分析.结果文库获得130个阳性克隆,鉴定96%有200～1 500bp插入片断.获得的35个基因中包括已知基因26个,功能未知基因5个,新基因4个.已知基因中包含酶、细胞信号转导、基因调控因子、转录调节因子、癌基因、抗凋亡因子及细胞的黏附与生长调节因子等相关基因.结论应用SSH方法成功构建HCC差异表达基因cDNA文库,筛选出低丰度和新基因在内的HCC差异表达基因.
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