家兔C型利钠肽基因真核表达载体的构建及鉴定

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【摘要】

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目的为开展C型利钠肽（CNP）基因治疗构建家兔CNP基因真核表达载体。方法通过RT-PCR从家兔腹主动脉组织中克隆CNP基因全长编码区,将该DNA片段亚克隆至克隆载体pMD 18-T中,用PstⅠ

【作者】

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张剑龚昆梅肖乐王昆华欧阳一鸣李临海黄映光朱宇

【机构】

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云南省第一人民医院普外一科

【出处】

：

重庆医学

【发表日期】

：

2012年27期

【关键词】

：

利钠肽 C型质粒克隆分子基因疗法兔 natriuretic peptide C-type plasmids cloning molecular

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金资助项目（30860276）,云南省科技厅科研基金资助项目（2007C248M）,云南省科技厅-昆明医学院应用基础联合专项基金资助项目（2008CD042）.

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目的为开展C型利钠肽（CNP）基因治疗构建家兔CNP基因真核表达载体。方法通过RT-PCR从家兔腹主动脉组织中克隆CNP基因全长编码区,将该DNA片段亚克隆至克隆载体pMD 18-T中,用PstⅠ单酶切筛选出负向插入片段,用HindⅢ和KpnⅠ双酶切将目的DNA片段定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,然后用双酶切、DNA序列测定鉴定方法对重组质粒进行鉴定。结果酶切及测序鉴定证实,家兔CNP基因全长编码区被准确插入到pEGFP-N1酶切位点HindⅢ和KpnⅠ中。结论含家兔CNP基因真核表达载体的成功

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