热休克蛋白质DnaK的纯化及其二聚体性质研究

来源 :天津科技大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woaiwodeqq
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通过定点突变技术构建了两个DnaK 蛋白质突变体,研究腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)和腺苷二磷酸(ADP)条件对热休克蛋白质DnaK 二聚体性质的影响.首先诱导表达DnaK 蛋白质的两个突变体DnaK-A303C 和DnaK-H541C,并采用硫酸镍亲和层析和阴离子交换层析对重组蛋白质进行纯化.对等量的DnaK 蛋白质进行氧化交联处理,然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测ATP、ADP 对DnaK 二聚体的影响.研究表明DnaK 突变体在ADP 的存在下以同二聚体的形式存在,但是在ATP 条件下
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