【摘 要】
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本实验根据牛线粒体差异序列设计特异性PCR引物和Taqman探针,并基于16S r DNA内参基因设计通用引物及Taqman探针,绘制并通过标准曲线确定样品中总DNA浓度以及牛源性成分DNA浓
【机 构】
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锦州医科大学,天津市农业质量标准与检测技术研究所
【基金项目】
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辽宁省自然科学基金项目(2015020776);辽宁省农业领域创新人才项目(2014037);国家自然科学基金(81703636)
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本实验根据牛线粒体差异序列设计特异性PCR引物和Taqman探针,并基于16S r DNA内参基因设计通用引物及Taqman探针,绘制并通过标准曲线确定样品中总DNA浓度以及牛源性成分DNA浓度,采用相对定量法测定肉制品中牛源性成分的质量分数。并通过特异性、灵敏度实验,及混合肉样回收率及市售肉制品检测,对本方法进行验证。结果表明,方法特异性强,可对牛肉DNA进行特异性扩增。最低检出限为10 pg/μL,具有较高的灵敏度。并根据回收实验可知,平均回收率为98.62%。可以为肉制品中牛肉含量的测定提供技术参考。
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