TRKC基因体外转染大鼠神经干细胞的方法

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目的 探讨体外转染TRKC基因的神经干细胞的制备方法。方法 利用自行合成的引物进行PCR反应,定向克隆构建TRKC-cDNA质粒并进行DNA测序分析,将pEGFP-C1质粒和TRKC-cDNA质粒进行酶切、重组,构建出pEGFP-C1-TRKC质粒。用脂质体将重组质粒转染到体外培养的大鼠神经干细胞中。用Western blot、免疫荧光和MTT法观察转染基因的表达和转基因后神经干细胞的增殖活性。结果 成功构建了TRKC-cDNA质粒,DNA测序证明所获得的目的基因与公布序列的一致性为99%,所获得的重组子
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