Mac-1-FP融合表达载体的构建、Mac-1-FP的表达与活性鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kkkjnc
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分别构建表达BFP与CD11b的C末端、YFP与CD18的N末端相连接的融合蛋白的表达载体,并将二者转染至既无内源性Mac-1的表达同时又具有某些炎症反应信号转导系统的CHO细胞株进行表达Mac-1-FP.通过荧光显微镜观察到共转染后的CHO细胞可发出蓝色荧光和黄色荧光,应用Western印迹方法确定CD11b-BFP与YFP-CD18能够形成二聚体,采用流式细胞术检测确定PMA刺激Mac-1-FP可由胞浆内转位至膜上,测定PMA刺激前后的转染CHO细胞与其配基ICAM-1粘附活性的变化,证明转染CHO中
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