川芎嗪对TNF-α诱导的人腹膜间皮细胞t-PA和PAI-1表达的影响

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【目的】探讨川芎嗪对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMCs)在肿瘤坏死因子‐α(TNF‐α)诱导后组织型纤溶酶原激活物(t‐PA)和纤溶酶原激活物抑制因子‐1(PAI‐1)表达的影响。【方法】应用胰蛋白酶消化法分离HPMCs进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常对照组(完全培养液)、单纯TNF‐α(1μg/L)诱导组和TNF‐α诱导加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40 mg/L)组。采用半定量反转录聚合酶链反应(RT‐PCR)法检测细胞内t‐PA和PAI‐1 mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中t‐PA和PAI‐1的蛋白质水平。【结果】与正常组比较,TNF‐α诱导组上清液中 t‐PA的含量减少和PAI‐1含量显著升高,且两组相比较差异有显著性( P <0.01);与TNF‐α诱导组比较,低、中、高剂量川芎嗪组上清液中t‐PA的含量增加,PA I‐1的含量显著降低,且两组相比较差异有显著性( P <0.05或 P <0.01)。与正常组比较,单纯TNF‐α诱导组 HPMCs t‐PA/β‐actin mRNA 下降(87±5)%和 PAI‐1/β‐actin mRNA 上升(3.63±0.12)倍( P <0.01);与TNF‐α诱导组相比,低、中、高剂量川芎嗪组t‐PA/β‐actin mRNA表达明显增加( P<0.05或 P <0.01)和PAI‐1/β‐actin mR‐NA表达明显减少( P<0.05,P<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系。【结论】川芎嗪干预后能促进 HPMCs在炎症状态下t‐PA生成增加并抑制PAI‐1的表达,从而减少纤维化的发生。
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